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细胞生物学平台扫描电镜样品处理需要哪些流程及注意事项?
2013/02/016753

一、流程:

1. 样品置于pH=7.2的固定液(含2%PFA和2.5%的戊二醛的混合液)中,固定1h左右或4°C过夜。
2. 0.1M的PB(pH7.2-7.4)缓冲液冲洗样品3次,10min/次。
3. 1%锇酸(in 0.1M PB)后固定1h。
4. 纯净水冲洗3次,15min/次。
5. 梯度酒精脱水,30%,50%,70%, 95% 10min,100%酒精3次,10min/次。
6. 临界点干燥。
7. 将干燥后的样品用双面碳胶带粘到样品台上。
8. 金属镀膜。
9. 电镜观察拍照。
二、注意事项:
步骤1-4应在通风橱里进行,样品在制备过程中要不停摇动,可以放在摇床上。
如果用户没有做电镜样品的经验,强烈建议在设计实验的时候就与电镜机组先咨询。送样之前和送样时需要与机组人员详细沟通。


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