仪器型号:TCS SP8 gSTED 3X
生产厂家:德国Leica公司
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受激发射损耗显微镜是第一个用来突破衍射极限的远场光学显微技术,使用精心设计的结构光构造出小于衍射极限的光点照明样品。其采用两束组合激光,一束激光被聚焦成正常的衍射极限焦斑,使焦斑内的荧光分子处于激发态;另一束是中心光强为零成环形焦斑的损耗光,两束光进行叠加,损耗光通过受激发射过程损耗周边区域内的激发态荧光分子,只剩下中心的荧光发光点,实现小于衍射极限的荧光发射面积。xy分辨率≤50nm,z轴分辨率≤130nm。
1. 显微镜: 全自动倒置荧光显微镜DMi8;
2. 激光器:
白激光:470-670nm(连续可调光谱脉冲固体激光器,脉冲频率80MHz);紫外:405nm;Ar离子激光:458,476,488,496,514nm;损减激光:592nm, 660nm,775nm;
3. 物镜: 10×/20×干镜,40×/63×水镜,40×/63×油镜,20×/40×长工作距离干镜,100×油镜 (STED专用,最佳色差校正) ,100×油镜 (TIRF专用,NA1.47);
4. LAS X 共聚焦软件:MicroLab 生理学软件包、Live data mode 专用软件、Huygens Deconvolution 软件;
5. 活细胞培养系统;
6. 自适应焦点跟踪系统(Adaptive Focus Control);
7. Super Z压电陶瓷高精度Z轴载物台(最小电子步进0.5nm);
8. HyD超高灵敏度检测器(GaAsP+APD混合式光谱通道检器);
9. AOBS声光分光器,无需滤光块和机械切换,最多可同时分离8根激光谱线;
10. 高速扫描共振振镜。
1. 可实现Gated STED (门控STED) 超高分辨成像,对于小于100nm的亚细胞器和蛋白分子进行超高成像,同时具有Z轴超高效果,并且适合活细胞的超高分辨率成像和长时程观测。分辨率<50nm(X,Y)和<150nm(Z)的完美的光学切面,揭示纳米级别的精细结构;
2. 自带共聚焦平台:可进行长时间、多通道荧光、Z轴序列和多点的图像采集;可进行大图拼接,能够进行快速3D/4D重建;可同时采集荧光和DIC图像;
3. 全光谱扫描和光谱拆分(精度1nm):进行激发-发射光谱扫描,对未知染料可进行激发发射谱研究,得到染料的最佳激发发射峰;
4. 超高灵敏度检测器HyD支持单分子测量,光子计数功能;
5. 全新Lightgate(门控)技术,结合HyD在激发脉冲后延时检测,可去除激发光的反射光、杂散光和样品自发荧光的干扰,提高信噪比,增强荧光图像反差;
6. 具有共振扫描振镜,可进行快速活细胞成像,钙离子成像;
7. 拥有AFC自适应焦点跟踪系统,实现长时间观察无焦点漂移,获得活细胞等样品长时间观测的理想数据。
1. 超高分辨率成像:xy分辨率小于50nm,z分辨率小于130nm;
2. 2D-6D图像采集(x, y, λ, z, t, p):可进行长时间、多通道荧光、Z序列、大图拼接和多点的图像采集;
3. Z序列扫描后快速3D/4D重建;
4. 钙离子等离子信号检测;
5. 激发发射光谱扫描和光谱拆分;
6. 双色及三色共定位实验;
7. FRET、FRAP、iFRAP、FLIP、PA等光操作;
8. 活细胞、活体组织、小型模式生物或类器官的长时程成像。